ePathology.ro

Tehnici de colorare uzuale (histopatologice) si speciale (histochimice)


Coloratia Hemalaun Eozina (HE)

Hematoxilina(solutie alcoolica) - Maturare prin oxidare -> Hemateina + Sulfat dublu de aluminiu si potasiu - > Hemalaun Meyer (coloratie progresiva) sau Hemalaun Harris (coloratie regresiva)

Indicatie:

• Coloratie uzuala standard pentru tesuturi

Coloranti:

• Hemalaun Meyer - bazic
• Eozina Gelbich - acida

Rezultate:

• Nucleu – albastru
• Citoplasma – roz / rosie

Coloratia Van Gieson
Indicatie:

• Coloratie uzuala tricroma pentru tesuturi

Coloranti:

• Hematoxilina ferica Weigert
• Fuxina acida
• Acid picric

Rezultate:

• Nucleu – negru
• Citoplasma – galbena
• Colagen – rosu

Coloratie Tricroma Masson
Indicatie:

• Coloratie speciala tricroma pentru tesuturi

Coloranti:

• Hematoxilina ferica
• Solutie coloranta A – acid fosfomolibdenic
• Solutie coloranta B – albastru de anilina

Rezultate:

• Nucleu – negru
• Citoplasma – rosie
• Colagen – albastru

Coloratia Giemsa

• Coloranti: sol. May Grumwald, sol. Giemsa, acid acetic
• Rezultate: nuclei – rosu violet, citoplasme policrome (de la albstru pal la albastru inchis), cartilaj albastru, mucina violet
• Utila pentru detalii morfologice in tesuturi limfoide: splina, ganglion limfatic, maduva osoasa
• In frotiuri cervico-vaginale este utila pentru detectarea Trichomonas Vaginalis

Coloratia Mallory

• Coloranti: fuxina acida, albastru Mallory

Coloratia AZAN

• Coloranti: azocarmin, albastru Heidenhein (anilina, orange G)
• Rezultate: nucleu – rosu, citoplasma - albastru rosiatica, colagen – albastru, tesut muscular striat – orange
• Utila pentru studiul glandelor endocrine

Coloratia Lie

• Coloranti: oxid galben de mercur, fuxina acida
• Rezultate: fibrele miocardice ischemice se coloreaza in rosu

Hematoxilina fosfotungstica (PTAH)

Coloratii pentru fibrele conjunctive

Pentru colagen:

• Coloratia Van Gieson, coloratia Masson

Pentru fibrele de reticulina:

• Impregnare argentica Gomori

Pentru fibre elastice:

• Rezorcin fucsina bazica Weigert – albastre
• Orceina – cafeniu roscate

Metoda Cajal Da Fano:

• Evidentiaza complexul Golgi – negru
• Citoplasma – aurie
• Nucleu – necolorat

Metoda hematoxilina ferica Regaud:

• Evidentiaza mitocondria – negru

Metoda Brachet:

• Coloranti: verde metil pironina
• Rezultate: DNA – verde, RNA - rosu

Impregnarea argentica Gomori
Coloranti:

• Permanganat de potasiu (KMnO4)
• Metabisulfit de sodiu si potasiu
• Solutie argento-amoniacala

Rezultate:

• Fibre de reticulina – negru
• Fibre de colagen – rosu purpuriu
• Nucleu – negru
• Citoplasma galbena

Bazofilia = proprietatea unor substante glucidice de a se colora cu coloranti bazici

• Albastru alcian – coloreaza MPZ acide in albastru la pH = 2.5

Metacromazia = proprietatea unor substante de a se colora diferit de colorantul utilizat (prin existenta unor grupari anionice ce absorb lumina diferit de restul agregatelor)

• Albastru de toluidina – evidentiaza mastocitele, a caror granulatii citoplasmice sunt rosii

Ortocromazia = proprietatea unor substante de a se colora la fel cu colorantul utilizat

• Rosu de Congo – evidentiaza amiloidul in rosu (in lumina vizibila) sau produce o birefringenta verde (in lumina polarizata)

Histochimia glucidelor, lipidelor si proteinelor

Histochimia glucidelor

Coloratia PAS:

• Coloranti: acid periodic HIO4, reactiv Schiff
• Rezultate: glucidele se coloreaza in rosu viu
• Variante: PAS cu diastaza, PAS – AB pH 2,5

Carmin amoniacal BEST:

• Glicogen - rosu

Histochimia lipidelor

Coloranti:

• Sudan (III, IV, B, BB)
• Scharlach
• Oil Red

Rezultate:

• Lipide colorate in rosu portocaliu

Observatie:

• Sunt coloratii la gheata, folosindu-se o solutie saturata alcoolica a colorantului

Histochimia proteinelor

Reactii nespecifice:

• Identificarea unor aminoacizi
  • Reactia Millon – pentru tirozina
  • Reactia Sakagushi – pentru arginina

Reactii specifice:

• Identificarea unor heteroproteine
  • Metoda Feulgen – pentru DNA complexat cu histone
  • Bazofilia

Coloratia Perls (albastru de Berlin)

• Coloranti: ferocianura de potasiu si HCl
• Rezultate: evidentiaza fierul in albastru

Coloratia Masson – Fontana

• Coloranti: azotat amoniacal de argint
• Rezultate: evidentiaza melanina in negru

Coloratia Grimelius (argentafina)

• Evidentiaza granule neuroendocrine

Coloratia cu rhodamina – pentru cupru
Coloratia Hymans van den Bergh – pentru bilirubina
Coloratia Rosu de Congo – pentru amiloid

Coloratii citologice si bacteriologice

• Coloratia Babes – Papanicolaou
• Coloratia May Grumwald Giemsa
• Coloratia Gram
• Coloratia Ziehl – Neelsen

Coloratia Babes - Papanicolaou
Indicatie:

• Citologie cervico-vaginala

Coloranti:

• Hematoxilina Harris
• Eozina alcoolica (EA 50)
• Orange G (OG 6)

Rezultate:

• Nuclei – albastri
• Citoplasme – cianofila (verde albastruie – celule intermediare) sau eozinofila (roz rosie – celule superficiale)

Coloratia Gram
Coloranti:

• cristal violet si
• rosu safranina

Rezultate:

• Bacterii Gram (+) – albastre
• Bacterii Gram (-) - rosii

Coloratia Ziehl – Neelsen
Indicatie: bacili acid alcoolo-rezistenti
Coloranti:

• Fuxina carbol bazica
• Albastru de metilen

Rezultate:

• Bacili rosii pe fond albastru

Observatie: reactia se face la cald